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                多肽生产线实验

                2018-04-27 09:41:06

                  实验⊙材料和方法

                  实验材料

                  多肽生产线,鱼蛋白酶解液。

                  实验过程

                  据分←析所需要的多肽产品的分子量为200~8000Da,其中以1000~5000Da的小肽活性佳。酶及水溶性大分子蛋白质】的分子量至少在10000Da以上。我们选择截留分子量10000Da以上的超滤和截留分子量200Da的纳滤集成的方↓法对酶解后的体系进行处理。工艺路线如下:

                  酶解→超滤━→滤液━→纳滤→浓缩液→喷雾干燥→多肽产品

                  肽的含〗量测定

                  高分子蛋白质在』酸性条件下易被沉淀,较低⌒ 分子量的蛋白质水解物即酸溶蛋白质,可溶于酸性溶液(其中包括肽及游离氨基酸)。样品经酸化后,滤液中的酸溶蛋白质含量减去游离氨基酸含量即为肽的含量。

                  测定时称取样品2.00g,加入15%TCA(三氯乙酸)溶液10ml,混合均匀,静置5min。将溶液♂定量转移,在4000r/min下离心10min后,取全部上№清液,按GB/T14771规定的方法测定上清液可溶蛋白质,按GB/T14965规定的方法测定游离氨基酸的含量。由酸溶蛋白质的测定值减去游离氨基酸的测定值即可计算出鱼多肽@的含量。

                  肽分子量的分布

                  对制得的鱼多肽,用SDS—PAGE(12%)凝胶电泳法进行分析[5],测定其分子量的分布。

                  多肽产品质量比较

                  样品

                  色泽

                  形态

                  滋味与气味

                  水中的溶解性质

                  A

                  黄色

                  粉末

                  有较浓的腥味

                  溶于水、混浊、粘稠

                  B

                  白色

                  粉末

                  有浅淡的腥味

                  溶于水、清澈、透亮

                  以上分析说明经膜浓缩除杂得到的多肽产品具有更好的质量。

                  利用▃介绍的方法测定A和B样品中多肽的含々量

                  多肽产品中多肽的含量

                  样品

                  多肽的含量

                  A

                  61.2%

                  B

                  79.6%

                  以上结果说明经膜浓缩除杂得到的多肽产品具有更高的纯度。

                  对制得的A及B鱼蛋白复合多肽,用SDS—PAGE(12%)凝胶电泳法进行分析[5],测定其分子量分布,结果见。

                  多肽产品的分子量分布

                  样品

                  分子量分布

                  A

                  200~10000

                  B

                  1000~7000

                  以上可看出,A样品中除多肽外还含有氨基酸和蛋白,B样品中基本只含有多肽。

                  结论

                  采用膜分离取代离心分离、冷冻干燥对鱼蛋白水解液进行除杂浓缩,浓缩液2的体积还不到酶解液的1/4,喷雾干燥所↑需的能耗显著降低,而且所得产品品质明显增加。

                  整个过程膜工作稳定,其分离♂效率高、能耗低的特点得到充分体现,且无污』水产生,莱特莱德大连水处理公司生产的多肽生产线可大幅度提高经济效益,降低成本,减少对环境的污染。

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                经典案例介绍